Una dilución en serie es la forma estándar en que los laboratorios preparan un rango de concentraciones conocidas a partir de una única solución madre, utilizada en placas de microbiología, titulación de anticuerpos/ELISA, curvas estándar para qPCR y otros ensayos, y cualquier protocolo que necesite varias concentraciones espaciadas por un factor constante. Esta calculadora ejecuta las series matemáticas paso a paso, los volúmenes de diluyente y transferencia por tubo, y la dilución total de un conjunto de entradas.
Cómo funciona la Calculadora de Dilución Seriada
En una dilución en serie, cada tubo se fabrica a partir del tubo anterior en lugar de hacerlo directamente del material original, excepto el primer tubo, que proviene del material original. Debido a que la reducción ocurre paso a paso, la concentración en el paso n es igual a la concentración del stock dividida por el factor de dilución elevado a la n-ésima potencia (DFⁿ). Esta combinación es la razón por la que un modesto factor por paso, como una dilución de 10 veces, produce una enorme reducción general después de sólo un puñado de pasos: cinco pasos de 10 veces ya dan una dilución total de 100.000 veces. También es por eso que la tabla de concentración utiliza un eje y logarítmico: en una escala lineal, los pasos posteriores parecerían indistinguibles de cero aunque no lo sean.
Los datos y qué significan
La concentración del stock es el valor inicial de tu solución sin diluir, en la unidad que estés siguiendo — ng/mL, UFC/mL, molaridad, o cualquier otra unidad de concentración consistente. El factor de dilución por paso debe ser mayor que 1; las opciones comunes son 2 para diluciones al doble (por ejemplo, titulación de anticuerpos) y 10 para diluciones logarítmicas (por ejemplo, siembra microbiológica). El número de pasos es cuántos tubos vienen después del stock. El volumen por tubo es el volumen final, en mililitros, que cada tubo debe contener una vez combinados la alícuota transferida y el diluyente — determina los volúmenes de transferencia y diluyente en la pestaña Volúmenes, pero no afecta la serie de concentración, ya que la concentración solo depende del stock y el factor de dilución.
Límites y casos extremos
El factor de dilución debe ser mayor que 1 — un factor exactamente igual a 1 significa que no ocurre ninguna dilución, y un factor menor a 1 requeriría un volumen de diluyente negativo, lo cual no tiene sentido físico. Un número muy grande de pasos combinado con factores grandes puede producir concentraciones extremadamente pequeñas que son fáciles de malinterpretar en una escala lineal, por lo que esta calculadora siempre grafica la serie en un eje logarítmico. La calculadora asume mezcla y pipeteo perfectos en cada paso; en la práctica, pequeños errores de pipeteo se acumulan a lo largo de una serie de la misma forma que lo hace la concentración, por lo que una serie más larga conlleva más incertidumbre acumulada que una corta.