Una dilución seriada es la forma estándar en que los laboratorios preparan un rango de concentraciones conocidas a partir de una sola solución stock — usada en siembra microbiológica, titulación de anticuerpos/ELISA, curvas estándar para qPCR y otros ensayos, y cualquier protocolo que necesite varias concentraciones espaciadas por un factor constante. Esta calculadora resuelve la matemática paso a paso de la serie, los volúmenes de transferencia y diluyente por tubo, y la dilución total a partir de un solo conjunto de datos.
Cómo funciona la Calculadora de Dilución Seriada
En una dilución seriada, cada tubo se prepara a partir del tubo anterior en lugar de directamente del stock — excepto el primer tubo, que proviene del stock. Como la reducción ocurre paso a paso, la concentración en el paso n es igual a la concentración del stock dividida entre el factor de dilución elevado a la potencia n (DFⁿ). Esta acumulación es la razón por la que un factor modesto por paso, como una dilución de 10 veces, produce una reducción total enorme después de solo unos pocos pasos — cinco pasos de 10 veces ya dan una dilución total de 100,000 veces. Es también la razón por la que el gráfico de concentración usa un eje y logarítmico: en una escala lineal, los pasos posteriores se verían indistinguibles de cero aunque no lo sean.
Los datos y qué significan
La concentración del stock es el valor inicial de tu solución sin diluir, en la unidad que estés siguiendo — ng/mL, UFC/mL, molaridad, o cualquier otra unidad de concentración consistente. El factor de dilución por paso debe ser mayor que 1; las opciones comunes son 2 para diluciones al doble (por ejemplo, titulación de anticuerpos) y 10 para diluciones logarítmicas (por ejemplo, siembra microbiológica). El número de pasos es cuántos tubos vienen después del stock. El volumen por tubo es el volumen final, en mililitros, que cada tubo debe contener una vez combinados la alícuota transferida y el diluyente — determina los volúmenes de transferencia y diluyente en la pestaña Volúmenes, pero no afecta la serie de concentración, ya que la concentración solo depende del stock y el factor de dilución.
Límites y casos extremos
El factor de dilución debe ser mayor que 1 — un factor exactamente igual a 1 significa que no ocurre ninguna dilución, y un factor menor a 1 requeriría un volumen de diluyente negativo, lo cual no tiene sentido físico. Un número muy grande de pasos combinado con factores grandes puede producir concentraciones extremadamente pequeñas que son fáciles de malinterpretar en una escala lineal, por lo que esta calculadora siempre grafica la serie en un eje logarítmico. La calculadora asume mezcla y pipeteo perfectos en cada paso; en la práctica, pequeños errores de pipeteo se acumulan a lo largo de una serie de la misma forma que lo hace la concentración, por lo que una serie más larga conlleva más incertidumbre acumulada que una corta.